| ภาษา : |
|
| ชุมชนวิกิพีเดีย |คำตอบสารานุกรม |ส่งคำถาม |ความรู้คำศัพท์ |อัปโหลดความรู้ |
เอนไซม์ Transposase |
 |
|
Transposase ฟังก์ชั่นเอนไซม์ดำเนินการโดยปกติ transposon การเข้ารหัสเพื่อระบุลำดับที่เฉพาะเจาะจงที่ปลายทั้งสองของ transposon สามารถ transposon ถูกหมุนออกจากลำดับที่อยู่ติดกันและแทรกเข้าไปในเว็บไซต์ดีเอ็นเอเป้าหมายใหม่ที่คล้ายคลึงกันไม่มี ความต้องการTnsABC * transposase เอนไซม์ TnsABC * เอนไซม์ที่ใช้ในซีรีส์ GPSTM ระบบ (GPS-1 จีโนมระบบ Sequencing ระบบการกลายพันธุ์ GPS-M และโปรตีนโครงสร้างจีพีเอส LS-ระบบการวิเคราะห์) เพื่อ pGPS พลาสมิดหลอดทดลอง Transprimer องค์ประกอบ transposable แทรกสุ่มเป็นเป้าหมายใด ๆ ที่ต้องการ ดีเอ็นเอ (1-3) แหล่ง ตามลำดับจากสามโปรตีนที่เป็นส่วนประกอบมีการเข้ารหัส TnsA, TnsB และสรท * พลาสมิด E.coliK-12 บริสุทธิ์ ใบสมัคร ระบบจีพีเอสที่ใช้สำหรับแหล่งที่มาของ transposon TN7 การขนย้าย บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา 1 × GPSBuffer25mMTris-HCl, 2mMATP, 2mMDTT (pH8.0 @ 25 ° C) เสริมห่วงโซ่การถ่ายโอน 15MM ปฏิกิริยาเริ่มต้น 37 ° C บ่ม นิยามหน่วย 0.08 μ g2.8kb การควบคุมการใช้พลาสมิดควบคุมระบบมาตรฐานปฏิกิริยาอย่างน้อย 1% ของโมเลกุลเป้าหมายสามารถได้รับจำนวนเงินที่แทรก transposon ของเอนไซม์ที่จำเป็นในการกำหนดเป็นหน่วย พลังความร้อน: 75 ° C10 นาที ประเภทขององค์ประกอบ transposable ใน prokaryotes ลำดับแทรก IS1 เป็นสังหาริมทรัพย์สมาชิกในครอบครัวของจีโนมทางพันธุกรรมก็สามารถรวมเข้ากับโฮสต์ของตนที่ไม่คล้ายคลึงกันซึ่งเป็นการขนย้าย (tronsposition) ถ้าเป็นที่ใส่เข้าไปในยีนยีนมักจะสูญเสียนี้ มีชีวิต ผลกระทบนี้จะขึ้นอยู่กับความแม่นยำเป็นเงื่อนไขที่เกี่ยวข้องกับ ปัจจัยที่ is2 เช่นแทรกไปในทิศทางเดียวกันในโครโมโซม, การแสดงออกของยีนจะลดลง แต่ในการรวมทิศทางตรงข้ามจะเพิ่มการแสดงออกของยีน เมื่อเทียบกับปัจจัยในทิศทางใด IS1 แทรกจะช่วยลดการแสดงออกของยีนนี้ จะกลายเป็น IS1 ~ 4 หลังตัวเลขที่สะท้อนให้เห็นถึงความคาดหวังของพวกเขาและแยกออกจากกันจำนวนรวมขององค์ประกอบ transposable ที่ไม่เกี่ยวข้อง โครโมโซมแบคทีเรียปกติและพลาสมิดที่มี IS สายพันธุ์ของ E.coli ดูเหมือนจะมีความหลากหลายของจำนวนสำเนา (<10) ปัจจัย ในสิ่งมีชีวิตเซลล์เป็นสมาชิกในครอบครัวหลายโครงสร้างของพวกเขาจะคล้ายกับปลายทั้งสองของซ้ำโดยตรงสั้น (directrepeats, DR) (เป้าหมายลำดับ) ยาวกว่าเล็กน้อยซ้ำคว่ำ (invertedrepeats, IR) และเกี่ยวกับ 1kb coding region มันก็เป็นเพียงการเข้ารหัสและเอนไซม์ transposase การขนย้าย การเลือกเป้าหมายในสามรูปแบบ: การเลือกสุ่มเลือกและเว็บไซต์เฉพาะทางเลือกที่ร้อน เนื่องจากมีการปรากฏตัวของซ้ำคว่ำดังนั้นหากมีพลาสมิดคือเอทิลแอลกอฮอล์แล้วและ refolded, สามารถสังเกตเห็นได้ในกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการปรากฏตัวของโครงสร้างลำต้นห่วง (23-30 รูป) คือการขนย้ายโดยการเร่งปฏิกิริยา transposase เอนไซม์ (transposase) ซึ่งประกอบด้วยเป็นรหัส แรกโฮสต์เป้าหมาย transposase เซตัดจุดและมีการแทรกปลายทางเดียวที่ควั่นกับโฮสต์จะเชื่อมต่อกับส่วนที่เหลือของช่องว่างจากดีเอ็นเอโพลิเมอร์และลิกาเซที่จะเต็มไปทำให้เกิดการก่อตัวของปลายแทรกของ DR เป็นเป้าหมาย ทำซ้ำ ลำดับการแทรกชั้น (IS-likeelements) คือ IS10R, IR50R IS903 และโครงสร้างของพวกเขาและเป็นที่คล้ายกัน แต่ไม่ได้อยู่อย่างอิสระ แต่เป็นส่วนประกอบ transposon แขน (compositetransposons) คอมโพสิต transposon คอมโพสิต transposon คอมโพสิตนานกว่าคือการเข้ารหัสภูมิภาคกลางเครื่องหมายต้านทาน ที่แตกต่างกันที่แตกต่างกัน transposon เครื่องหมายต้านทานคอมโพสิต องค์ประกอบของ transposon คอมโพสิตจบชั้นโดยองค์ประกอบที่เป็นและ บางองค์ประกอบสองด้านเหมือนกัน (เช่น Tn903) และบางส่วนที่แตกต่างกัน (เช่น Tn10) บางส่วนของทิศทางเดียวกัน (เช่น Tn9) และบางส่วนไปในทิศทางตรงกันข้าม (เช่น Tn903, 10,5) เฉพาะฟังก์ชั่นบางอย่าง (เช่น Tn903, 10), เพียงบางชิ้นส่วนที่เหมาะสมจะทำงาน มันคาดการณ์ว่าเมื่อสององค์ประกอบอิสระที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาของภาคกลางเป็น transposon คอมโพสิต โครงสร้างนี้อาจจะให้โดยปัจจัยการขนย้ายอยู่ใกล้กับเว็บไซต์ผู้บริจาคของตนรับ ทั้งสองส่วนอาจจะเหมือนหรือต่างกัน แต่ละองค์ประกอบของความสามารถในการขนย้าย transposon คอมโพสิตอธิบายจากทั้งสองส่วนจะยังคงกดดันการเลือกใช้งาน ใน transposon คอมโพสิตสิ่งที่แต่ละองค์ประกอบและไหล่บทบาทที่นั่งในการเปลี่ยนมันคืออะไร โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีของทั้งสองส่วนมีฟังก์ชั่น ใน Tn9 ตัวอย่างชิ้นส่วนที่มี IS1 ปัจจัยที่ชี้ให้เห็นว่าพวกเขาจะทำงาน ทำไมขนย้ายขนย้ายของทั้งซับซ้อนมากกว่าตัวเองหรือไม่ สองปัจจัยที่ทำให้โฟลเดอร์ที่ลำดับของการขนย้ายใด ๆ REPLICON เช่นแหวนของทั้งสองส่วนประกอบของ IS10L Tn10 และ IS10R, สามารถมองเห็นเป็นส่วนประกอบของลำดับ REPLICON ที่ปลายทั้งสองเพื่อให้การขนย้ายต่อไปเมื่อมันสามารถไม่เพียง แต่ทำให้ transposon Tn10 ยังพอใจ REPLICON ลำดับ transposon แต่ทั้งสองด้านขององค์ประกอบในลำดับที่แตกต่างกัน Tn10 ครอบครัว TNA transposon (transposon, TN) เป็นอีกหนึ่งครอบครัว TNA ประมาณ 5KB ดังนั้นลงท้ายด้วย IR มากกว่าคือไม่เพียง แต่รหัสภูมิภาคของเครื่องหมายต้านทานการเข้ารหัสกลางยังเข้ารหัส transposase เอนไซม์เอนไซม์แยกออกจากกัน TNA คือการคัดลอกจากการขนย้าย transposons ในครอบครัวนี้ Tn3 และ Tn1000 (γδ) การศึกษามากที่สุดอย่างหนาแน่น ปกติประมาณสิ้น 38bp IR, IR ทั้งในหนึ่งในสองการลบถูกต้องที่ออกฤทธิ์จะป้องกันไม่ให้ขนย้าย เป้าหมายเว็บไซต์ 5BP ไปข้างหน้าการทำสำเนาจะถูกสร้างขึ้น พวกเขามาพร้อมกับเครื่องหมายต้านทาน (23-33 รูป) TnpA ไกล่เกลี่ยการขนย้ายในสองขั้นตอนตามลำดับโดย tnpA, tnpR เข้ารหัส transposase เอนไซม์ (transposase) และแยกออกจากกันเอนไซม์ (resolvase) ให้เสร็จสมบูรณ์ สองคนนี้มีเอนไซม์ที่จะออกบัตรผ่านการควบรวมกิจการ การขนย้ายดังกล่าวและจุดสิ้นสุดของ IR ลำดับที่แยกออกจากกัน (res) เป็นตำแหน่งพิเศษภายในเพียง TNA นี้จุดหนึ่งที่มีครอบครัว |
| ผู้ใช้งาน ทบทวน |
|
ยังไม่มีความเห็น |
